|
|
 |
专题栏目 |
 |
|
相关文章 |
|
 |
广告区域 |
 |
|
|
|
|
 |
抗人类免疫缺陷病毒-1治疗现状及研究进展（1） |
★★★★★ |
|
| 抗人类免疫缺陷病毒-1治疗现状及研究进展（1） |
|
作者：sexkang 文章来源：性康网 点击数： 更新时间：2006-9-21 12:07:36  |
|
获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是由HIV感染引起的一种严重的疾病，当人类免疫缺陷病毒(HIV)侵入人体后借细胞表面的CD4分子及某些趋化因子受体侵犯宿主细胞，造成机体免疫功能破坏，进而引起严重的机会性感染及肿瘤。现就该病治疗的中心环节--抗病毒治疗的临床应用现状及研究进展作一介绍。
一、抗HIV-1化学药物的临床应用现状
抗HIV-l的化学药物主要作用于病毒生活周期中不同环节所必需的酶类如逆转录酶及蛋白酶。目前用于临床的药物主要有：1.核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)，包括齐多夫定(AZT)、扎西他滨(ddC)、去经肌苷(ddi)、拉米夫定(3TC)、司他夫定(d4T)、Abacavir(Ziagen)及Combivir(3TC与AZT的复合剂)等；2．非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)，包括奈韦拉平(NVP)、地拉韦定(Delavidin)、依非韦伦(Stocrin或Efavirenz)等；3．蛋白酶抑制剂(PI)，包括沙哇那韦(SAQ)、利托那韦(Ritonavir)、英地那韦(IDV)、奈非那韦(Nefinavir)等；4．其他，如整合酶抑制剂--Zintevir及羟基脲(Hydroxyurea)等。针对单一用药疗效差、病毒易于变异而产生抗药性等问题，临床上采用联合用药方案，亦称"鸡尾酒"疗法或高效抗逆转录病毒疗法(HAART)，标准的治疗方案为2种NRTI加1种PI，如AZT/3TC/IDV或AZT/3TC/Ritonavir或AZT/3TC/SAQ等，此系初治者的首选方案；但由于交叉抗药性及药物的毒副作用等，最近有学者提出2种NRTI加1种NNRTI(AZT/3TC/Efavizenz)或3种NRTI(AZT/3TC/Abacavir)的方案，疗效与标准方案相当。作为一种替代方案，羟基脲ddI联用的疗效虽较标准的HAART差但费用降低了2倍，是发展中国家目前抗HIV-1的可选方案。当前HAART的目标仍是尽可能长时间地、最大限度地将H1V-l抑制到最低水平，但有学者认为长时间的用药抑制HIV-1使机体免疫功能亦因得不到病毒抗原的刺激受抑，而调动机体的抗病毒免疫是获得持续控制病毒的关键，故又提出了HAART的间歇疗法，即整个疗程中用药与停药间隔进行(两期为2:1)，目的是短期停药使血浆病毒载量有限反弹，循环中的病毒抗原刺激机体免疫系统激发抗HIV-l的细胞免疫及体液免疫来进一步清除病毒，以后经过反复的用药、停药，使每次反弹的病毒水平较用药前的水平低，最终达到彻底清除体内残存的病毒。这种方案的优点是可明显降低用药的毒副作用及费用，其有效性正在进一步验证中。4种药的联合(2种NRTI十2种PI或2种NRTI十1种PI十1种NNRTI)是否能更好的抑制病毒也正在研究中。HAART的应用显著地降低了患者血浆病毒载量，增加了CD4+细胞计数，延缓了病情的进展，尤其是显著降低了母婴传播率。但持续反应率低、停药后反跳率高、长期用药严重毒副反应(如骨髓抑制、肝损伤、胃肠道反应、高血糖、高血脂及脂肪重新分布等)、交叉抗药性的产生、昂贵的费用和复杂剂型带来的不便均成为这一治疗的严重障碍。这也迫使人们不断探索新的可行的治疗方案。
二、针对HIV-l本身的抗病毒基因治疗
抗HIV-1的基因治疗就是将能抑制HIV-1复制的外源基因导入到感染HIV-1的或正常的宿主细胞以产生抗病毒效果。主要有：反义RNA(包括核酶)、RNA诱饵、DNA治疗性疫苗及以蛋白为基础的基因治疗。
1．反义RNA的抗HIV-l的作用 反义RNA是指能与特异的mRNA分子互补结合的一段RNA分子，它从翻译水平封闭基因表达，并干扰mRNA的剪切、加工而实现抗病毒作用。
tat为HIV-l重要的调节基因、其编码的Tat蛋白是HIV-1重要的反式激活因子，Lisziewicz等研究小组设计的在逆转录病毒启动子LTR之后连接反义tat与多聚TAR的构建物(LTR-25TAR-AS-TAT)、具有反义tat及TAR诱饵的双重作用，并由于LTR启动子受Tat蛋白的反式激活，使该基因在HIV-l感染的细胞中高表达，将这种外源基因导入Molt-3 T细胞系、CEM-SS T细胞系及健康人外周血单个核细胞(PBMCs)，对实验及临床分离病毒株均有抑制作用，将此反义构建物转导人及猴造血干细胞，定向分化成T细胞及巨噬细胞后仍具有抗HIV-l及SIV作用。
gag是HIV-1的结构基因，编码p24等病毒结构蛋白，Veres等构建了细胞内表达互补于-gag区不同长度的反义RNA(225-1225nt)的逆转录病毒载体，在CEM-SS T细胞及外周血CD4细胞均有抑制HIV-l复制的作用，而长片段反义RNA的抗HIV-l作用更好，这可能是由于长 片段反义RNA能与不同准种的HIV-l RNA结合而限制了病毒的逃逸。
反义RNA作用的靶点亦有选于env(编码病毒膜蛋白gpl20、gp41)、rev(编码Rev蛋白，对病毒复制有反式激活作用)、pol(编码逆转录酶、整合酶、蛋白酶)、TAR(Tat反应元件)、RRE(Rev反应元件)，均显示不同程度的抑制HIV-1复制及延长感染细胞的生存期，但并不能阻止HIV-l对细胞的感染。
核酶(Rz)是具有特异切割靶RNA的一种特殊的反义RNA分子，由具有切割作用的活性中心及与靶序列特异互补的侧翼序列组成。根据其二级结构不同分为锤头结构核酶及发夹结构核酶。核酶不仅具有高度特异性的裂解靶RNA的作用，而且在裂解后能自行脱落，再和其他的靶分子结合、定点切割，故为高效特异的反义RNA。它对新侵入的病毒RNA、从前病毒刚转录出的RNA、mRNA、成熟的病毒基因组RNA均起作用。Michienzi等构建了针对Rev前体mRNA的核酶(Rz)及活性中心突变体(Rz m)，转导Jurkat细胞得到稳定表达，用HIV-1 ⅢB株感染此细胞，转导Rz的细胞产生p24抗原较转导Rz m的细胞产生的明显降低，显示这种对HIV-l的抑制是由核酶的催化活性完成的，而非其反义的作用。Wang等构建的靶向于tat的核酶转导CEM T4细胞及PBL细胞，均能抑制HIV-l感染，且未见靶序列发生突变。1997年核酶抗HIV-l的I期临床试验，取得了令人鼓舞的结果。
2．RNA诱饵的抗HIV-l作用 RNA诱饵是利用病毒复制过程中的调节网络，引入外源核苷酸序列，高度表达能与病毒复制过程中重要的调节蛋白结合的RNA分子，这种RNA分子能和病毒相应的基因竞争性地结合这些调节蛋白而抑制病毒的复制。在抗HIV-1的RNA诱饵中，常用TAR或RRE相应序列为诱饵，大量的体外实验已显示出RNA诱饵有良好的抗HIV-l复制的作用，如导入293细胞的HIV-2 TAR序列诱饵(TAR-2)对HIV-l及HIV-2的感染均有抑制作用；另有研究示多聚TAR-1诱饵对HIV-l及SIV有同样的抑制效应，表明病毒基因的变异并不影响诱饵与病毒蛋白的结合，避免了由于病毒变异而产生对抗HIV-l治疗的抵抗。RNA诱饵与其他反义RNA、核酶或单链抗体(Fv)联合应用具更强的抗病毒作用。Kohn等将RRE诱饵用逆转录病毒载体导人4例HIV-1感染者的骨髓干细胞再输回患者体内，进行1年的临床观察，未见任何毒副反应，显示其临床应用的潜力。
3．抗HIV-l治疗性DNA疫苗 DNA治疗性疫苗就是将病毒抗原的重组表达载体导人体内，使在体内产生病毒抗原而激发机体产生针对这种抗原的保护性体液免疫及细胞免疫。这种内源性抗原类似减毒活疫苗的抗原而又无潜在致病的危险性，Boycr等构建的含有HIV-l env及rev基因的DNA疫苗在鼠及猴的实验，显示能刺激特异性的体液及细胞免疫反应，给感染免疫缺陷病毒的黑猩猩用此种DNA疫苗后，体内抗体上升，病毒载量下降，并显示良好的耐受性。最近，该研究组又将含有rev和env编码基因的APL-400-003质粒构建物分别给15例无症状的HIV-1感染者肌肉注射，在36周的随访期中，耐受性好，血浆中转入的目的基因的RNA水平保持稳定、抗gpl20抗体增加，部分患者精液中的HIV RNA含量明显减低，未见抗核抗体的产生及明显的毒副反应，进一步的研究仍在进行中。
4．以蛋白为基础的抗HIV-l的基因治疗 主要是在细胞内导入外源基因使合成病毒蛋白的突变体或针对病毒成分的单链抗体，干扰病毒基因的逆转录、病毒蛋白的合成及释放。已构建的有代表性的病毒蛋白突变体为Rev M10，该突变体是采用定点突变技术构建的使野生型Rev蛋白于第78、79位的亮氨酸、谷氨酸分别被门冬氨酸、亮氨酸取代，这种突变的蛋白与RRE结合能力无改变，但丧失了其反式激活活性，因而可与野生型蛋白竞争结合位点，对HIV-l的复制产生剂量依赖性的抑制作用。1998年Ranga等在一系列研究的基础上将用逆转录病毒构建的Rev M10导入3例HIV-l阳性者的CD4+T细胞，体外有明显的抑制HIV-l的作用，将此转导细胞再回输患者体内显示能较长时间(6个月)的表达Re M10，未见由外源蛋白引起相关免疫反应。
细胞内表达单链抗体也是目前抗HIV-1研究的热点。Bou等将抗整合酶的单链抗体基因用逆转录病毒载体转入人T细胞系(SuP Tl)，可明显减轻HIV-1所致的细胞病变，同时p24抗原产生减少。抗gp120及抗Tat单链抗体的构建物，转导HIV-1感染者外周血CD4+T细胞亦有相似效果，但以蛋白为基础的抗HIV-1基因治疗的一个使人担心的潜在问题是异源蛋白所具有的免疫原性带来的麻烦。
目前，抗HIV-1基因治疗总的趋势是由单靶位发展到多靶位、多方案的联合，从单单是细胞系的体外研究转向原代细胞及骨髓干细胞的回体(ex vivo，即人体细胞在体外导人外源基因后再回输体内)研究，并对外源基因的表达设计了调控机制。相信随着某些关键技术的突破，基因治疗对HIV-l感染的预防及控制将产生重要作用。
（转下页）
|
|
| 性疾病录入：admin 责任编辑：admin |
|
|
上一篇性疾病： 婴幼儿HIV感染的诊断
下一篇性疾病： 中国艾滋病病人实际约20万,2006年底将超过30万 |
|
|
| 【字体：小 大】【发表评论】【加入收藏】【告诉好友】【打印此文】【关闭窗口】 |
|
 网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！） |
| |
|
|
|
|
